Гормональная поддержка в циклах ЭКО: стандартный или индивидуальный подход?
Гормональная поддержка в циклах ВРТ: стандартный или индивидуальный подход?
Мясина Е. Л.
Прогестерон
Прогестерон и МЦ
* В естественном цикле (ЕЦ) эндометрий готовится к имплантации эмбриона под влиянием стероидных гормонов, продуцируемых клетками фолликула.
* Пик ЛГ в середине МЦ приводит к созреванию ооцита, разрыву преовуляторного фолликула, трансформации клеток гранулезы.
* В результате лютеинизации клеток гранулезы начинается синтез прогестерона (Пг).
* После имплантации секреция Пг продолжается не только клетками яичника, но и клетками синцитиотрофобласта, а затем формирующейся плацентой.
Пг и беременность
* Уровни Пг при зачатии линейно связаны с частотой выкидышей, преждевременных родов, задержки внутриутробного развития и нормальных доношенных родов.
* Для адекватной секреции Пг желтому телу требуется постоянная стимуляция ЛГ, который имеет пульсирующую секрецию из гипофиза под влиянием ХГЧ. В основном ХГЧ секретируется из развивающихся синцитиотрофобластов плаценты со 2-й нед. имплантации. Он также взаимодействует с рецептором L-HCG яичника для поддержания желтого тела, т. о. желтое тело продолжает секретировать Пг для поддержки беременности в I тр. Роль желтого тела особенно важна в первые 8 нед. беременности.
Причина применения больших, «нефизиологичных» доз Пг в ЭКО
Особенности стимуляции:
* Применяются препараты, которые блокируют выработку эндогенного ЛГ, и его пульсирующая выработка, необходимая для секреции Пг желтым телом, отсутствует.
* Высокий уровень эстрадиола приводит к подавлению секреции ЛГ.
* Пункция фолликулярной жидкости приводит к подавлению выработки Пг.
Т. о. применение Пг необходимо в программах ВРТ для успешного наступления беременности.
Многочисленные КИ (1981-2003): причины недостаточности ЛФ в ЭКО
* Аспирация гранулезных клеток при пункции фолликулов.
* Длительное и замедленное восстановление гипофиза после использования длинных протоколов приводит к дефектам ЛФ в программе ЭКО.
* Выявлено негативное влияние анти-ГнРГ на течение ЛФ и исходы программ ЭКО.
* Частота наступления беременности при отсутствии поддержки ЛФ не превышает 7,5%.
* Введение ХГЧ по механизму отрицательной обратной связи вызывает недостаточность ЛГ.
* Супрафизиологические уровни стероидов, секретируемых большим количеством желтых тел в начале ЛФ, подавляют секрецию ЛГ по механизму отрицательной обратной связи.
Большой метаанализ 2019 г. - поддержка во II фазе: когда начинать в циклах ЭКО?
Начало приема Пг на следующий день после пункции фолликулов было наиболее полезным с точки зрения клинической частоты наступления беременности.
Другие работы показывают, что начало применения Пг в первые 3 суток после пункции дает высокую частоту наступления беременности.
Обзор Cochrane 2015
Препараты для поддержки ЛФ в программе ЭКО:
* Пг (пероральный, вагинальный, в/м).
* Пг + эстрадиол.
* Пг + ХГЧ.
Выводы:
* Пг ассоциирован с более высокой частотой родов или прогрессирующей беременности, чем плацебо.
* Добавление эстрогенов или ХГЧ не улучшает исходы, а ХГЧ связан с повышенным риском СГЯ.
* Способ введения Пг не имеет значения.
* Добавление одной (0,1 мг) или нескольких доз агониста ГнРГ к Пг ассоциировано с более высокой частотой прогрессирующей беременности и родов, чем только Пг.
Обзор Cochrane 2020: препараты для поддержки ЛФ в программах ЭКО
* Начало прием препаратов Пг в периоды до 48 ч или 48-96 ч после пункции не показало отличий по частоте наступления беременности.
* Добавление агониста ГнРГ к вагинальному Пг показало значительное преимущество в отношении живорождения.
* Прием препаратов Пг (любые формы) эффективнее, чем плацебо.
* Препараты эстрогенов не показали преимуществ.
* ХГЧ, по-видимому, приводит к улучшению показателей живорождения, однако результаты в основном были основаны на более ранних и небольших исследованиях.
Дозы препаратов (протоколы ЭКО — ESHRE 2019)
* 50 мг в/м Пг 1 р/сут. Или
* 25 мг Пг п/к 1 р/сут. Или
* 90 мг вагинального геля 1 р/сут. Или
* 600 мг микронизированного Пг (200 мг 3 р/д).
Применение Пг должно быть продолжено как минимум до теста на беременность.
Дидрогестерон вероятно не рекомендован для поддержки ЛФ в ЭКО.
Дозы препаратов («свежие» циклы)
* После переноса эмбриона пациентке рекомендовано назначить препараты Пг или дидрогестерон.
* Длительность их назначения в случае наступления беременности определяется врачом акушером-гинекологом в соответствии с инструкцией к назначению, особенностями течения беременности и анамнезом пациентки, но обычно продолжается до 12 нед.
Поддержка 2 фазы в программах ЭКО
1. Триггер ХГЧ
* ХГЧ (5000-10000 МЕ) может индуцировать окончательное созревание ооцитов и поддерживать функцию желтого тела в течение примерно 5 дней из-за более длительного периода полураспада.
* К моменту имплантации эмбриона начинает снижаться уровень ХГЧ (от триггера овуляции), что негативно влияет продукцию эндогенного Пг.
* Необходимо добавлять Пг с этого времени до момента, когда эндогенный ХГЧ начинает секретироваться имплантированным эмбрионом.
2. Триггер агонист ГнРГ
* Коэффициент сродства ГнРГ-а к ГнРГ в 2-5 раз выше, чем у эндогенного ГнРГ.
* Индукция эндогенного пика ФСГ и ЛГ, но величина активности ЛГ ниже, чем триггер ХГ.
* Без поддержки 2 фазы цикла средняя продолжительность жизни желтого тела после триггера ГнРГ-а составляет всего 4 дня.
* Ранние исследования, изучающие ГнРГ в качестве триггера с последующим введением обычных доз поддержки ЛФ, продемонстрировали неприемлемо низкую частоту имплантации. Поскольку качества эмбрионов были сопоставимы, а частота имплантации в циклах донорства ооцитов и в крио-протоколах не была нарушена, был сделан вывод, что проблема заключается в аномальной ЛФ.
3. Триггер агонист ГнРГ. Американский подход
Триггер агонист ГнРГ рекомендован при планировании криоконсервации эмбрионов и для профилактики гиперстимуляции.
* Добавление как эстрадиола, так и Пг после пункции фолликулов, и корректировка доз по мере необходимости в соответствии с уровнями стероидов в сыворотке.
* Пг в/м 2-4 р/сут + эстрадиол (4-8 мг per os/0,4 мг 4 р/д на кожу), уровень ПРГ крови к моменту переноса должен быть не менее 20 нг/мл, эстрадиола — не менее 200 пг/мл.
4. Триггер агонист ГнРГ. Европейский подход
* Двойной триггер (агонист ГнРГ + ХГЧ 1000-2500 ME).
* Низкие дозы ХГЧ в день пункции фолликулов (1500 ME).
* Низкие дозы ХГЧ после пункции фолликулов (1500 ME через 2-3 дня после пункции).
* ХГЧ ежедневно 125 ME с 2-6 дня стимуляции 2 фазы и в течение всего времени поддержки ЛФ (без Пг).
* Рекомбинантный ЛГ (исследование Papanikolaou: 300 ME рЛГ назначали в день OPU, OPU+2, OPU+4, OPU+6, OPU+8 и OPU+10 помимо стандартной поддержки Пг. Контрольная группа использована ХГЧ в качестве триггера. По сравнению со стандартным протоколом, новая схема приема лютеиновой кислоты рЛГ достигла аналогичной частоты имплантации и сроков родоразрешения).
Формы выпуска препаратов Пг
* Внутримышечный Пг.
* Подкожный Пг.
* Вагинальный Пг (капсулы, гель, кольцо).
* Пероральный Пг.
1. Внутримышечный Пг
* В/м инъекция — распространенная форма Пг на масляной основе, которая используется уже несколько десятилетий.
Преимущества:
* Суточная доза — 25-50 мг (1-2 инъекции/сут).
* Обеспечивает постоянный уровень Пг в сыворотке с пиковой концентрацией около 8 часов (считается особенно эффективным вариантом в Северной Америке).
* Быстрое всасывание — высокая концентрация в плазме через 2 ч.
* После ежедневного в/м введения 25 мг Пг достигается концентрация в плазме, эквивалентная концентрации в ЛФ ЕЦ.
* Цена и доступность в РФ.
Недостатки:
* П/э от в/м введения масляного р-ра: покраснение, боль, рубцы, инфекции, инфильтраты, абсцессы, воспалительная реакция и даже редко — легочные осложнения (эозинофильная пневмония).
* Неудобный путь из-за обязательных ежедневных посещений клиники/процедурного применения.
* Длительное применение при наступлении беременности.
2. Подкожный Пг
Преимущества:
* Суточная доза — 25 мг (1 инъ./сут).
* После ежедневного п/к введения 25 мг Пг достигается концентрация в плазме, эквивалентная концентрации ЛФ в ЕЦ.
* Доза 25 мг сопоставима по эффекту с 90 мг вагинального геля.
Недостатки:
* Ежедневные инъекции.
* Высокая стоимость.
* Длительное применение инъекций при наступлении беременности.
3. Вагинальный Пг
Преимущества:
* Способ введения (предпочтительный в программах ВРТ).
* Хорошая биодоступность — адекватный уровень Пг в эндометрии при более низких концентрациях в крови.
* Отсутствие печеночного метаболизма.
Недостатки:
* П/э — выделения из влагалища при приеме препарата (более выраженные при приеме микронизированного Пг).
Вагинальный Пг: какой лучше?
В результате многочисленных КИ:
* Не выявлено преимуществ какого-либо из препаратов вагинального Пг в «свежих» циклах по CPR, FHR, MR.
* Не выявлено преимуществ какого-либо из препаратов вагинального Пг в крио-протоколах по CPR, FHR, MR.
Применение дидрогестерона (Human Production)
* 37 центров 10 стран мира.
* Сравнение 30 мг дидрогестерона и 8% вагинального геля (90 мг).
* Дидрогестерон не менее эффективен.
* Частота наступления беременности в выборке полного анализа (FAS) на 12 неделе беременности составила 38,7% (191/494) и 35,0% (171/489) в группах перорального дидрогестерона и вагинального геля.
Эстрогены в ЭКО
Применение препаратов эстрадиола в циклах ЭКО (любые формы) не повышает частоту наступления беременности.
Агонисты ГнРГ
* Однократное применение агониста ГнРГ (0,1 мг) в день переноса — активация желтых тел.
* Локальная экспрессия эндометриальных рецепторов может активировать эндокринно-паракринные пути, ведущие к секреции ангиогенных факторов, факторов роста, цитокинов и молекул адгезии.
Агонист ГнРГ Триптолерин 0,1 мг (метаанализы 2010, 2019 гг)
* Повышает частоту наступления беременности, частоту прогрессирования беременности в циклах с антагонистами ГнРГ и длинных протоколах с агонистами ГнРГ, а также снижает частоту потерь беременности.
Международный опыт применения Пг в поддержке ЛФ в циклах ВРТ, 2020 (данные опросов экспертов в сфере ВРТ в течение 10 лет: в 2009, 2012, 2018, 2018 гг)
* Доля врачей в мире, которые предпочитают вагинальную форму Пг составляет более 70%. Причем данный показатель вырос с 2009 по 2012 год, а в 2012, 2018, 2019 гг остается примерно одинаковым.
* С годами стали чаще применять вагинальные формы Пг, и меньше Пг в виде инъекций.
* Часть специалистов (16-17%) использовали комбинацию нескольких форм Пг.
* Длительность применения: большинство экспертов отмечают отмену в сроке 8-10 и после 10-12 нед. беременности. Если в 2009 г в сроке 8-10
нед. беременности отменяли Пг 44% экспертов, то в 10-12 нед. — 65%.
* Сейчас есть тенденция к более ранней отмене препаратов Пг без какого-либо риска для беременности.
Длительность поддержки ЛФ
Физиология беременности:
* ХГЧ стимулирует выработку Пг желтым телом яичника в малом сроке;
* с 8 недели беременности Пг начинает вырабатываться хорионом (препараты Пг можно отменять);
* с 16 нед. беременности плацента берёт на себя всю функцию выработки Пг, редукция желтого тела.
Как отменять поддержку ЛФ?
* при отрицательном результате — отмена сразу;
* при наступлении беременности — индивидуально (акушерский анамнез, особенности течения беременности) — единого подхода нет;
* препараты Пг — постепенная отмена с положительного теста (не применяется)/визуализации сердцебиения эмбриона/после 12 нед.;
* большинство исследований не обнаружили никакой пользы от длительного введения препаратов Пг при беременности после ЭКО;
* распространенная практика: при неотягощенном анамнезе — отмена с 8-9 нед. беременности.
Криоконсервация эмбрионов
Мировая тенденция — рост числа витрификаций эмбрионов, развитие стратегии «freeze-all». Доля «freeze-all» от общего числа пункций в 2017 году:
* 26,5% в Австралии и Новой Зеландии.
* 19,2% в США.
* 8,5% в Европе.
Качество эмбрионов
КИ, опубликованное в RBMO (анализ переноса 11 936 размороженных эмбрионов):
* Наиболее значимым фактором, влияющим на имплантацию является качество трофэктодермы (TE).
* Эмбрионы 5-х суток развития имеют большую частоту имплантации, чем эмбрионы 6-х суток.
* При TE типа A или B и заморозке эмбрионов на 5 сутки частота рождения детей составляет 33,1 и 42,8% (для TE B / для хэтчингующейся и экспандирующейся TE, соответственно). При заморозке таких же эмбрионов на 6 сутки данный показатель снижается до 27,8 и 29,9%, соответственно.
* Такое же снижение показателей отмечается и при TE типа С.
Подготовка эндометрия в крио протоколах
1. Заместительная гормональная терапия (ЗГТ):
* с агонистами ГнРГ;
* без агонистов ГнРГ.
2. ЕЦ:
* с поддержкой ЛФ цикла;
* без поддержки ЛФ цикла.
3. Модифицированный ЕЦ (МЕЦ):
* МЕЦ с поддержкой ЛФ.
* МЕЦ без поддержки ЛФ.
4. Цикл минимальной стимуляции (клостилбегит/летрозол/рФСГ).
1. ЗГТ.
Эстрогены
Особенность — раннее назначение эстрогенов — с 1, 2, 3 дц (для подавления спонтанного роста фолликулов). Схема применима для пациенток старшего репродуктивного возраста с неполноценной 1-й фазой мц, при истощении/низком овариальном резерве яичников, при СПЯ, либо для «удобства» пациента и врача (легко управляемый цикл).
Режимы назначения:
* фиксированная доза: эстрадиола валерат — 6 мг/сут;
* повышение дозы: эстрадиола валерат по 2 мг/сут с 1 по 7 дц, 4 мг/сут с 8 по 12 дц, 6 мг в сутки с 13 дц.
Нет достоверных отличий по LBR при разных режимах.
Выбор эстрогенов
* Нет отличий в эффективности и частоте наступления беременности между разными режимами препаратов (таб., трансдермальный гель).
* 1,25 г трансдермального эстрадиола = 1 мг эстрадиола валерат.
Предпочтения врачей (179 центров ВРТ, 56 стран, 39 152 цикла переноса крио эмбрионов):
* 84% прием per os (наиболее просто управляемая схема);
* 9% трансдермальная форма (в РФ применяют чаще всего);
* 3% вагинальная форма (в РФ отсутствует).
Пг в циклах ЗГТ (сроки назначения)
Оптимально — 12-14 д. приема эстрогенов, толщина эндометрия не менее 7 мм.
* Менее 10 дней — повышение риска потери беременности в I тр.
* Максимальная длительность приема — до 28 дн.
Дозы и формы выпуска Пг
Вагинальные формы:
* вагинальный гель;
* микронизированный Пг.
Перенос — на 6 сутки Пг (120-124 ч с начала приема или 5,5 суток с момента начала приема Пг)!
Дозы:
* вагинальный гель — 90 мг/сут;
* микронизированный Пг — 800 мг/сут.
Агонисты ГнРГ — нужны или нет в крио протоколах?
* Исследования не показали преимуществ циклов с агонистами ГнРГ (Cochrane, 2020).
* Цикл ЗГТ без агониста ГнРГ предпочтительнее для пациента.
* Риск спонтанной преждевременной овуляции в циклах ЗГТ 1,9-7,4%.
* Показания: ранняя овуляция (сниженный резерв), аденомиоз 3-4 ст., точные сроки переноса (пациенты из других городов/стран).
ЕЦ
* Предпочтителен для пациентов с регулярным овуляторным циклом.
Вариации:
* без гормональной поддержки;
* назначение препаратов Пг.
Проведение ЕЦ
* УЗИ на 2-3 дц — исключение функциональных кист и желтого тела (контроль Пг, норма — менее 1,5 нг/мл);
* УЗ и гормональный мониторинг при достижении фолликулом размера 15-16 мм (определение уровня ЛГ, эстрадиола и Пг);
* Повышение уровня Пг более 5 пмоль/л в день пика ЛГ — снижение частоты наступления беременности;
* Перенос на 6-е сутки после пика ЛГ или 5-е сутки после УЗ-подтвержденной овуляции.
МЕЦ
* УЗИ — 2-3 дц, исключение функциональных кист и желтого тела (контроль Пг, норма — менее 1,5 нг/мл).
* При достижении фолликулом размера 16-20 мм — назначение триггера.
* Задачи триггера: овуляция, активация желтого тела, повышение выработки эндогенного Пг.
* Перенос на 7- е сутки после введения триггера (день триггера — день 0).
Необходим контроль овуляции!
Триггер назначается для стимуляции овуляции, экзогенный ХГЧ дополнительно активирует желтое тело, повышает выработку эндогенного Пг (этот протокол можно вести без дополнительной поддержки препаратами Пг). Перенос в этом случае проводится на 7 сутки после введения триггера. Практический совет: необходим анализ ЛГ в день введения триггера. При высоком уровне ЛГ овуляция произойдет не через 36 ч, а на следующий день, что может привести к более позднему переносу эмбриона.
Цикл стимуляции яичников
* Показание — ановуляторные циклы (СПЯ).
* УЗИ 2-3 дц — назначение стимуляторов (клостилбегит — 50-100 мг/сут или летрозол 2,5-5 мг/сут или р ФСГ 50-100 МЕ/сут).
* Триггер — при размере фолликула 17 мм и толщине эндометрия не менее 7 мм.
* Перенос — через 7 дн. после введения триггера.
* Летрозол не обладает негативным эффектом на эндометрий (off label в РФ, требуется дополнительное согласие пациентки на стимуляцию).
Какой протокол подготовки эндометрия лучше?
* Выше эффективность у циклов со стимуляцией, чем циклов ЗГТ.
* Нет разницы по эффективности циклов, в которых произошла овуляция (ЕЦ, МЕЦ, стимулированный цикл).
* Летрозол и гонадотропины — выше эффективность, чем при клостилбегите.
Почему циклы ЗГТ статистически менее эффективны? (E.Lamberta et al, 2021)
* Сравнительный анализ частоты прогрессирования беременности в зависимости от уровня Пг в день переноса.
* Если уровень Пг был менее 8-9 нг/мл, то частота наступления беременности была ниже на 10%, а в группе с еще более низким уровнем Пг — на 15% в сравнении с пациентами, у которых в день переноса Пг был более 8 или 9 нг/мл.
Выводы:
* При уровне Пг менее 8,8-10 нг/мл значимо снижаются шансы на наступление беременности при переносе эмбриона, повышается риск потери беременности.
* Дополнительный фактор риска низкого значения Пг — ожирение.
* Существуют десятки публикаций с результатами исследований, которые подтверждают стойкую зависимость между частотой рождения детей и уровнем Пг в день переноса эмбриона.
Что делать при низком Пг?
* Отменять протокол?
* Оптимизировать протокол?
* Повышать дозу вагинального Пг?
Индивидуальный подход!
Анализ эффективности (2021) переноса 1 эуплоидного эмбриона в циклах ЗГТ.
Всего 574 цикла:
* циклы ЗГТ;
* перенос 1 эмбриона;
* контроль Пг за день до переноса.
Группы:
* Группа 1 — 348 циклов ( Пг за день до переноса более 10,6 нг/мл).
* Группа 2 — 226 циклов ( Пг за день до переноса менее 10,6 нг/мл).
Тактика ведения:
* Группа 1 — продолжили ЗГТ + перенос.
* Группа 2 — продолжили ЗГТ + п/к ежедневно 25 мг Пг, снова контроль Пг в день переноса (в 98% на уровень Пг после добавления п/к Пг был более 10,6 нг/мл) + перенос.
Нет отличий по:
* частоте наступления беременности = 56,4% vs 59,1%;
* частоте выкидыша 12,4% vs 9,2%;
* прогрессированию беременности = 49,4% vs 53,6%;
* частоте родов живым плодом = 49,1% vs 52,3%.
Какой протокол подготовки к переносу эмбрионов выбрать?
* Частота наступления беременности и частота родов выше у пациенток с «желтым» телом.
* ЕЦ предпочтительнее для крио протоколов.
Исходы беременностей при крио переносе
* Выше риск гипертензивных расстройств, холестаза при беременности в циклах ЗГТ в сравнении с крио в ЕЦ.
* Ниже вес детей в циклах ЗГТ.
* Выше риск преждевременных родов.
Неонатальные и материнские исходы беременностей в результате крио переносов (сравнительный анализ)
* Не обнаружено существенной разницы в отношении преждевременных родов и низкой массы тела при рождении между различными крио протоколами.
* В циклах ЗГТ выше частота гипертензивных расстройств при беременности, послеродовых кровотечений, переношенных родов и макросомии.
* Стимулированные циклы имели результаты, аналогичные ЕЦ.
* Результаты предполагают связь между отсутствием желтого тела и неблагоприятными акушерскими исходами.
Какой протокол подготовки эндометрия лучше?
Ретроспективный когортный анализ 12 950 циклов крио переносов (2010-2017).
* Анализ показал отсутствие особой разницы по частоте биохимической беременности при применении различных протоколов.
* Нет особой разницы по частоте наступления клинической беременности.
* Частота потерь беременности была достоверно меньше, чем в группе ЗГТ. По всей видимости, это связано с неусвоением либо недостаточным воздействием экзогенного Пг.
Вагинальный Пг
* Новая лекарственная система, позволяющая увеличить время пребывания и стойкость гормональных препаратов, что достигается за счет использования мукоадгезивного состава.
* Преимущество биоадгезивного геля — выделение Пг с относительно постоянной скоростью в течение длительного времени, что на практике позволяет вводить препарат однократно в течение 24 ч.
* Простота использования и удобная форма. Консистенция — плотная, не вызывает обильных выделений, как при применении микронизированного Пг.
Миражэль
Первый российский биоадгезивный вагинальный гель Пг.
Пг 8% — 90 мг/доза.
Доступен по стоимости.
Преимущества Миражэль
Биоадгезивная технология
* Гель «приклеивается» к стенке влагалища и не вытекает.
* Обеспечивает постоянный уровень высвобождения Пг.
* Удобное применение: 1 р/д.
Форма выпуска
* 2 формы выпуска 20 г и 50 г с 1 и 3 аппликаторами в комплекте.
* Легко выбрать необходимый размер упаковки на курс лечения.
Стоимость
* Самая низкая стоимость 1 дня лечения среди вагинальных Пг.
* 1 упаковки 50 г хватает на 44 дня.
* 1 упаковки 20 г хватает на 18 дней.