Преимущества неинвазивного пренатального тестирования в системе скрининга I триместра

Roggo Lorenz

Пренатальный тест Harmony – это лишь один из тестов Roche направления «Женское здоровье». Он используется уже миллионом женщин и его популярность растет, что, соответственно, позволяет пополнять базу результатов.

Преимущества теста Harmony

Тест основан на исследовании внеклеточной ДНК плода в крови матери. Доказана его эффективность для беременных женщин любого возраста и любой группы риска.

* Прежде всего ориентирован на обнаружение трисомий по 21, 13 и 18 хромосомам.

* Может быть использован как при одноплодной, так и многоплодной беременности с 10 недель гестации, рекомендован при беременности в цикле ЭКО.

* Дополнительно дает возможность определения пола плода и анеуплоидий половых хромосом.

NB! Тест является скрининговым, поэтому положительный результат всегда требует подтверждения инвазивным методом.

Уникальность метода Harmony – это направленный (таргетный) анализ внеклеточной ДНК

1. После забора крови применяется метод DANSR– таргетный анализ участков нужных хромосом с точным измерением фетальной фракции внеклеточной ДНК.

2. Алгоритм FORTE –определяет количество хромосом и долю плодной ДНК, учитывая возраст матери и срок гестации.

3. Отчет Harmony – содержит: индивидуальный расчет степени риска для каждой пациентки, с указанием процентного содержания фетальной фракции.

Метод DANSR и алгоритм FORTE являются запатентованными технологиями компании Roche.

Преимущества метода DANSR – точный таргетный анализ участков нужных хромосом

В отличие от рандомного анализа всех хромосом при массовом параллельном секвенировании, таргетное исследование участков нужных хромосом увеличивает глубину и точность анализа.

Для определения и подсчета плодной фракции вкДНК используется технология на основе определения однонуклеотидных полиморфизмов (SNP).

Данный метод позволяет более точно определять долю плодной фракции.

Преимущество алгоритма FORTE –индивидуальный расчет для каждого пациента (позволяет увеличить аналитическую разница между положительными и отрицательными результатами)

В НИПТ, основанных на параллельном секвенировании, используется Z-статистика, частота ложных результатов при которой напрямую зависит от количества вкДНК в крови матери (чем меньше ДНК, тем выше риск ложного результата). Z-статистика не позволяет получить индивидуализированный риск, а лишь вероятность «да» или «нет».

Алгоритм Forte при анализе учитывает долю плодной фракции вкДНК, возраст матери и срок гестации, что позволяет более точно определить высокую и низкую вероятность наличия патологии и, таким образом, увеличить разницу между ложноположительными и ложноотрицательными результатами.

Важность точного определения плодной фракции

Ограничение теста Harmony – доля плодной фракции вкДНК должна быть не менее 4%, что эффективно определяется методом DANSR.

Опубликовано исследование, в котором образцы небеременных женщин были направлены в 5 лабораторий. Две из них (лаборатория Roche в том числе) в заключении указали невозможность проведения анализа из-за отсутствия или низкой доли фракции плодной ДНК. Остальные 3 лаборатории предоставили отрицательный результат – женский пол плода без анеуплоидий. Этот эксперимент наглядно демонстрирует важность определения плодной фракции ДНК и выбор используемых методов.

Тест Harmony опирается на обширные доказательства

Существует большое количество клинических исследований (13), три из которых независимые. Около 30 000 женщин принимали в них участие. Для сравнения, для теста Verifi (Illumina), проведено 4 КИ, из них 0 независимых, на чуть более 5000 женщин. Для теста Panorama (Natera) – известно 3 КИ, из которых 0 независимых, для 1 500 женщин.

Характеристики подтверждены множеством исследований

Объединенные данные опубликованных 10 «слепых» кагортных исследований, включивших около 23 000 беременностей

Чувствительность

* Трисомия 21 – более 99% (ложноположительные результаты (ЛПР) – менее 0,1%).

* Трисомия 18 – 97,4% (ЛПР – менее 0,1%).

* Трисомия 13 – 93,8% (ЛПР – менее 0,1%).

Исследование NEXT с использованием теста Harmony

* Это самое большое «слепое» проспективное исследование НИПТ на настоящий момент (35 клинических центров в 6 странах (США, ЕС)).

* Сравнение проводилось с комбинированным скринингом 1 триместра (СПТ).

* В исследуемую группу были включены женщины из общей популяции (поэтому отсутствует валидация по группам высокого риска).

* Средний срок гестации – 12,5 недель.

* Статистически значимое определение чувствительности и специфичности выявления трисомии 21.

Выводы

Тест Harmony достоверно превосходит СПТ по выявлению трисомии 21 хромосомы в общей популяции беременных.

* Чувствительность – 100% (СПТ – 79%).

* ЛПР – 0,06% (СПТ – 5,4%).

* Прогностическая ценность положительного результата – 81% (СПТ – 3,4%).

Таким образом, тест Harmony более, чем в 90 раз уменьшает число ЛПР и в 20 раз превосходит по прогностической ценности положительного результата.

* Отсутствие результата – 3% (из них 1,2% по причине низкой доли плодной фракции, 0,5% по причине невозможности измерения плодной фракции и 1,3% - погрешности теста). В 68% случаев при повторном заборе крови был получен результат, что свидетельствует о целесообразности повторного исследования при отсутствии результата в первый раз.

Публикация регистра Harmony: сводные данные по коммерческим образцам

Самое крупное исследование клинического применения на сегодняшний день (338 000 женщин).

Данное исследование демонстрирует уровень ЛПР – 0,08%, что значительно превосходит результаты СПТ.

Тест можно заказать 2-мя способами: отправить образец непосредственно в лабораторию Harmony в США или в лабораторию одного из партнеров, которые доступны в более, чем 100 странах (в РФ – это компания Genetico).

В ряде стран Европы НИПТ финансируется государством для пациентов из группы высокого риска по результатам СПТ или возрасту.

Проведение НИПТ важно для женщин любого возраста, а не только в старшей возрастной группе, поскольку доля рожденных с синдромом Дауна детей выше у женщин младше 35 лет (в связи с большим количеством родов).

5 причин выбрать тест Harmony

* Валидация множеством «слепых» контролируемых КИ.

* Определяет, учитывает и выдает результат о доле плодной фракции вкДНК.

* Высокая точность, низкая частота ЛПР.

* Доказанная эффективность для всех возрастных групп и групп риска.

* Доступность в стране.

Вопросы

Когда лучше проводить УЗИ: до или после НИПТ?

НИПТ – это не диагностический, а скрининговый тест, поэтому даже при его отрицательном значении, УЗИ должно быть проведено в рекомендуемые сроки.

Нужен ли НИПТ при низком риске традиционного СПТ?

В данном случае нет показаний для проведения НИПТ.

Срок беременности для проведения теста? Как долго проводится тест (дни)? Приблизительная стоимость?

Самый ранний срок проведения – 10 недель. Продолжительность исследования в лаборатории Harmony – 3 дня, более точные сроки и стоимость уточняются в лаборатории Genetico в РФ.

Работает ли тест и какова его информативность при использовании донорских ооцитов в циклах ЭКО? Отличается ли она при использовании собственных ооцитов. Были ли ошибки в определении пола плода?

Тест может использоваться как при использовании собственных, так и донорских яйцеклеток, но перед проведением теста эта информация должна быть указана при заполнении соответствующего опросника (используется другой алгоритм). Чувствительность в отношении определения пола плода высока, но при наличии мозаицизма плаценты или других факторов, могут быть ошибки.

Определяется ли резус-фактор плода у резус-отрицательных женщин при помощи НИПТ?

На сегодня тест Harmony не определяет резус-фактор, возможно, в будущем этот пункт будет включен.

Планируется ли выпуск расширенной панели Harmony для диагностики микроделеционных синдромов?

На сегодня не планируется включение всех микроделеционных синдромов, но во второй половине этого года будет дополнительно определяться с-м Ди-Джоржи.